Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ?

Метод лабораторной диагностики, основанный на взаимодействии "антиген-антитело" называется иммуноферментным анализом (ИФА). Это позволяет выявлять белковые вещества, такие как ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей. В настоящее время современная диагностика невозможна без ИФА и других высокочувствительных лабораторных анализов.

В прежние времена врачи вынуждены были опираться на косвенные признаки болезни и проводить длительные микроскопические исследования в целях определения возбудителя инфекции. Сегодня всего один тест, такой как иммуноферментный анализ, может подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз, что значительно облегчает процесс диагностики.

Осмысление метода иммуноферментного анализа возможно благодаря пониманию реакции «антиген — антитело». Непригодные для организма молекулы, зачастую белкового происхождения, которые могут попасть в инфицированный организм, называются антигенами. Кроме того, частицы крови, не совпадающие с собственной группой, также могут являться антигенами. В свою очередь, антигены могут вызвать иммунную реакцию, направленную на защиту внутренней среды человека от неизвестных веществ. Процесс реакции «антиген — антитело» заключается в синтезе антител (иммуноглобулины) организмом, которые могут связаться с антигеном, образовав иммунный комплекс. Клетки иммунной системы легче распознают такие комплексы и уничтожают их.

Обзор основных показателей

Один из способов определить наличие инфекционного процесса в организме - это анализ на наличие класса иммуноглобулинов. Существует несколько видов иммуноглобулинов, которые можно использовать для анализа заболевания: IgM, IgA и IgG.

Присутствие IgM свидетельствует о наличии острого инфекционного процесса в организме. Если IgM не выявлено, это может указывать на то, что в организме отсутствует конкретный возбудитель, либо же инфекция перешла в хроническую стадию.

Если результат теста на IgM отрицательный, а уровень IgA повышен, это обычно свидетельствует о реинфекции, хроническом или скрыто протекающем заболевании.

Если же обнаружены оба класса иммуноглобулинов - IgM и IgA, это может указывать на разгар острого периода заболевания.

Наличие IgG может говорить о хронизации заболевания, либо о том, что организм выработал иммунитет к инфекционному агенту и начал выздоравливать.

Выводы о состоянии здоровья человека следует делать на основе результатов всего комплекса анализов и сведений о состоянии здоровья в целом.

Возможные результаты ИФА

В сданном на анализ образце, ИФА может выявить наличие или отсутствие антител и антигенов в зависимости от того, какая информация была указана в заполненном бланке. Результаты могут быть представлены в виде таблицы, где все антитела и антигены будут перечислены с обозначением отрицательной или положительной реакции, или в виде количественного значения. В последнем случае будет указано количество содержащихся антител в данном образце.

Еще одним количественным показателем может быть индекс авидности антител, выраженный в процентах. Этот показатель определяет, сколько времени прошло с начала инфекционного процесса. Чем выше этот индекс, тем больше времени прошло с момента инфицирования.

Сегодня разрабатываются тысячи различных тест-систем ИФА, которые позволяют обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных заболеваниях. Поэтому, ИФА широко используется в медицине для диагностики большинства патологических состояний. Простой и быстрый анализ помогает назначить правильную терапию для эффективного лечения заболевания.

Классификация видов антител

Антитела имеют несколько различных разновидностей, каждая из которых выполняет свою функцию на разных стадиях иммунного ответа. Первыми антителами, которые синтезируются в ответ на проникновение антигена в организм, являются иммуноглобулины класса M (IgM). Эти антитела достигают наибольшей концентрации в первые дни инфекционного процесса.

За ними следуют иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до окончательной победы над инфекцией. Кроме того, IgG продолжает циркулировать в организме, обеспечивая иммунитет к повторному инфицированию. Благодаря вакцинации, которая включает в себя ослабленные антигены микробов и вирусов, в крови появляются большие количества IgG. При контакте с реальной угрозой эти антитела быстро подавляют инфекцию до того, как она сможет навредить здоровью.

Кроме IgM и IgG, существуют и другие виды антител, такие как иммуноглобулины класса A (IgA), которые содержатся в больших количествах в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму, и иммуноглобулины класса E (IgE), которые борются с паразитарными инфекциями. В лабораторной диагностике чаще всего используются IgM, IgG и IgA: по уровню концентрации этих антител можно определить, на какой стадии инфекционного процесса находится организм, а также узнать, было ли у человека когда-либо то или иное заболевание (например, краснуха или ветряная оспа).

Иммуноферментный анализ – что это такое?

Одна из главных задач врача – правильно идентифицировать причину заболевания. Когда диагноз неочевиден, врачи часто назначают иммуноферментный анализ пациенту для измерения концентрации гормонов или определения наличия инфекции в организме. Иммуноферментный анализ помогает узнать, какие антигены или антитела содержатся в организме человека.

Реакцию, известную как «антиген-антитело», можно воспроизвести в лабораторных условиях, используя антитела или антигены для определения наличия соответствующих соединений в образце.

При проведении иммуноферментного анализа лаборатория получает образец биологической жидкости – обычно это сыворотка крови. Затем, используя пластиковые планшеты с лунками, в которых находятся очищенные антигены предполагаемого возбудителя или антитела, лаборатория проводит реакцию. Если антиген вступает в контакт с антителом, образуется иммунный комплекс. При этом специальное красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, и результаты анализа определяются инструментальной оценкой оптической плотности.

ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае анализ дает однозначный ответ на наличие или отсутствие вещества в образце. Во втором случае используются более сложные реакции для определения концентрации антител в крови. Это позволяет более точно оценить характер развивающегося заболевания.

Еще одним важным плюсом иммуноферментного анализа является его безопасность для сотрудников лаборатории. До появления ИФА врачи использовали радиоиммунный анализ, который мог представлять опасность для здоровья диагностического персонала. Изобретение ИФА в 1971 году существенно улучшило безопасность анализа и позволяет врачам делать более точные диагнозы.

Какие преимущества у метода ИФА?

Метод ИФА (иммуноферментный анализ) – это эффективный и чувствительный метод диагностики многих заболеваний, который позволяет точно идентифицировать антитела или антигены в крови. Он имеет множество преимуществ перед другими методами диагностики.

Высокая чувствительность. Одним из основных преимуществ метода ИФА является его высокая чувствительность. Это значит, что метод позволяет распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока.

Высокая специфичность. Ещё одним преимуществом ИФА является его высокая специфичность. Это означает, что метод позволяет производить диагностику без ошибок. Если результат положительный, значит, найдены именно те антитела или антигены, которые предполагались, а не какие-то другие.

Возможность определить заболевание на ранней стадии. Одним из главных преимуществ метода ИФА является возможность определить заболевание на ранней стадии. Метод ИФА во многом заменил золотой стандарт микробиологии – бактериологический метод диагностики. Благодаря ИФА, для идентификации возбудителя достаточно обнаружить IgM-антитела в крови. Это значительно повышает точность диагностики и позволяет начать лечение на ранних этапах болезни.

Низкая вероятность ошибки. В методе ИФА снижается вероятность ошибки благодаря высокой степени технологичности проведения анализа, минимизирующей влияние человеческого фактора. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

Минусы данного метода

В ходе проведения иммуноферментного анализа (ИФА) необходимо знание, что конкретно искать, так как методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому, для преднамеренного «угадывания» диагноза, нет необходимости назначать такой тест.

Для выявления возбудителя и определения его специфичных свойств при диагностики инфекционных заболеваний, ИФА неспособен. Этот метод лишь показывает наличие антител в крови пациента, непосредственно указывающих на наличие инородного микроорганизма в организме.

Несомненно, ИФА является высокоточным методом, однако он не является самым дешевым, поэтому для правильного его применения, необходимо подходить умным образом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Назначение и обнаружение заболеваний с помощью ИФА анализа имеет множество показаний, особенно для диагностики инфекционных заболеваний, аутоиммунных заболеваний и определения уровня гормонов в крови. Некоторые из многочисленных целей анализа включают:

• Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
• IgM и IgG к вирусным гепатитам A, B, C, D и E;
• IgG к ВИЧ;
• IgM и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
• IgM и IgG к вирусу Эпштейна — Барр;
• IgM и IgG к герпетическим инфекциям;
• IgM и IgG к токсоплазмозу;
• IgM и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
• IgG к паразитарным заболеваниям;
• IgM и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
• IgG к хеликобактерной инфекции.
• Оценка присутствия маркеров некоторых аутоиммунных заболеваний.
• Обнаружение онкологических маркеров, таких как простатспецифический антиген, раково-эмбриональный антиген и другие.
• Определение содержания гормонов в сыворотке крови, таких как прогестерон, пролактин, тестостерон, тиреотропный гормон и другие.

Основным материалом для проведения иммуноферментного анализа (ИФА) является сыворотка крови. Для получения образца крови, который будет использован в лаборатории для проведения анализа, необходимо взять его из вены у пациента. Далее, из полученного образца удаляют форменные элементы, которые могут помешать проведению анализа. Однако, иногда для анализа могут использоваться и другие материалы, такие как спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Для получения точных результатов рекомендуется сдавать кровь натощак, а также за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от принятия антибиотиков и противовирусных препаратов. Как правило, соблюдение этих рекомендаций помогает избежать искажений в результатах анализов.

Смотрящий срок готовности результатов ИФА

Если на складе имеются нужные реактивы и сбалансированная организация работы лаборатории, время ожидания результатов анализа может составить один или два рабочих дня после взятия крови. В случае, когда требуется получение экстренного ответа, этот период может быть сокращен до двух-трех часов.

Переписывая статью о расшифровке иммуноферментного анализа, стоит сохранять ее структуру без значительных изменений.

Иммуноферментный анализ (ИФА) - это диагностический метод, который используется для определения наличия или отсутствия определенного вещества в образце. В случае качественного ИФА результат будет однозначным: искомое вещество найдено или не найдено. Однако, если проводится количественный анализ, то концентрация может измеряться числовыми значениями или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

Фото: freepik.com